Anlage 29
NACHWEIS UND QUANTITATIVE BESTIMMUNG VON NATRIUMJODAT
ANWENDUNGSBEREICH
Diese Methode beschreibt die Identifizierung und quantitative Bestimmung Natriumjodat in kosmetischen Mitteln, die nach Gebrauch sofort ausgespült werden.
A. IDENTIFIZIERUNG
1. PRINZIP
Natriumjodat wird von anderen Halogenaten durch Dünnschichtchromatographie getrennt und durch Oxidation von Jodid zu Jod nachgewiesen.
2. REAGENZIEN
Alle Reagenzien müssen analysenrein sein.
2.1. Referenzlösungen: Wässrige Lösungen von Kalium-Chlorat, -Bromat und -Jodat, 0,01 % (m/v), frisch zubereitet.
2.2. Fließmittel: Ammoniaklösung 28 % (m/v) – Aceton – Butanol: 60 – 130 – 30 (v/v/v)
2.3. Wässrige Kaliumjodidlösung, 5 % (m/v)
2.4. Stärkelösung, 1-5 % (m/v)
2.5. Salzsäure, 1 M
3. GERÄTE
3.1. DC-Fertigplatten Cellulose, Schichtdicke 0,25 mm
3.2. Übliche Ausstattung für Dünnschichtchromatographie
4. VERFAHREN
4.1. Etwa 1 g der Probe wird mit Wasser extrahiert, filtriert und auf etwa 10 ml verdünnt.
4.2. 2
l dieser Lösung (4.1) und jeweils 2
l jeder der drei Referenzlösungen (2.1) werden auf die Grundlinie einer DC-Platte (3.1) aufgetragen.
4.3. Die DC-Platte in ein Entwicklungsgefäß stellen und mit aufsteigender Chromatographie mit dem Fließmittel (2.2) bis zu etwa drei Viertel der Länge der Platte entwickeln.
4.4. Die Platte aus dem Entwicklungsgefäß entfernen und das Fließmittel bei Zimmertemperatur verdampfen lassen.
Dauer: bis zu 2 Stunden.
4.5. Die Platte mit Kaliumjodidlösung (2.3) besprühen und etwa 5 Minuten lang trocknen lassen
4.6. Die Platte mit Stärkelösung (2.4) besprühen und wieder etwa 5 Minuten lang trocknen lassen
4.7. Abschließend die Platte mit Salzsäure (2.5) besprühen
5. AUSWERTUNG
Ist Jodat anwesend, so erscheint unmittelbar ein brauner (eventuell auch blauer) Fleck mit einem Rf-Wert von ca. 0-0,2. Bromate werden ebenfalls sofort sichtbar bei einem Rf-Wert von ca. 0,5-0,6; Chlorate nach etwa 30 Minuten bei einem Rf-Wert von ca. 0,7-0,8.
B. QUANTITATIVE BESTIMMUNG
1. DEFINITION
Der Gemäß dieser Methode bestimmte Natriumjodatgehalt der Probe wird in Masseprozent Natriumjodat angegeben.
2. PRINZIP
Natriumjodat wird in Wasser gelöst und durch Hochdruckflüssigkeitschromatographie unter Verwendung von zwei hintereinander geschalteten Säulen – eine reverse phase C 18-Säule und eine Anionenaustauschsäule – bestimmt.
3. REAGENZIEN
Alle Reagenzien müssen analysenrein und für die Hochdruck-Flüssigkeitschromatographie geeignet sein.
3.1. Salzsäure, 4 M
3.2. Wässrige Natriumsulfitlösung, 5 % m/v
3.3. Natriumjodat-Stammlösung: 50 mg Natriumjodat/100 ml Wasser
3.4. Kaliumdihydrogenorthophosphat
3.5. Dinatriumhydrogenorthophosphat . 2H2O
3.6. Mobile Phase für die HPLC: Löse 3,88 g Kaliumhydrogenorthophosphat (3.4) und 1,19 g Dinatriumhydrogenorthophosphat . 2 H2O (3.5) in einem Liter Wasser. Der pH dieser Lösung beträgt 6.2.
3.7. Universalindikatorpapier, pH 1-11
4. GERÄTE
Übliches Laborgerät
4.1. Papierfilter, 110 mm Durchmesser, Schleicher und Schüll Nr. 575 oder gleichwertiges
4.2. Hochdruckflüssigkeitschromatograph mit UV-Detektor mit variabler Wellenlänge
4.3. Säulen: 2 hintereinandergeschaltete Säulen von jeweils 120 mm Länge und 4,6 mm Innendurchmesser.
Säulenfüllung: | 1. Säule: NucleosilR 5 C 18 oder gleichwertiges |
| 2. Säule: VydacTM-301-SB oder gleichwertiges |
5. VERFAHREN
5.1. Probenvorbereitung
5.1.1. Flüssige Proben (Shampoos)
Wäge eine Probemenge von etwa 1 g einen 10 ml Meßkolben genau ein.
Fülle mit Wasser zur Marke auf und mische.
Falls erforderlich, filtriere die Lösung.
Bestimme das Jodat in der Lösung mittels HPLC wie in Absatz 5.2 beschrieben.
5.1.2. Feste Proben (Seifen)
Wäge eine zuvor fein zerkleinerte Probemenge von etwa 1 g in einen 100-ml-Meßzylinder mit Glasstopfen genau ein. Fülle mit Wasser bis 50 ml auf und schüttele 1 Minute lang kräftig.
Zentrifugiere und filtriere durch ein Papierfilter (4.1) oder lasse die Mischung mindestens eine Nacht stehen, schüttele die gallertartige Lösung kräftig und filtriere sie durch ein Papierfiltet (4.2). Bestimme das Jodat im Filtrat mittels HPLC wie in Absatz 5.2 beschrieben.
5.2. Chromatographie
Flowrate: 1 ml/min
Detektionswellenlänge: 210 nm
Einspritzvolumen: 10
l
Messung: Peakfläche
5.3. Eichgerade
Pipettiere 1.0, 2.0, 5.0, 10.0 bzw. 20.0 ml der Natriumjodatstammlösung (3.3) in 50-ml-Meßkolben. Fülle mit Wasser zur Marke auf und mische. Die so erhaltenen Lösungen enthalten 0.01, 0.02, 0.05, 0.10 bzw. 0.20 mg Natriumjodat pro ml. Injiziere 10
l von jeder Standard-Jodatlösung in den Flüssigkeitschromatographen (4.3). Bestimme die Peakflächen für Jodat und zeichne die Eichgerade: Peakfläche – Natriumjodatkonzentration.
6. BERECHNUNG
Berechne die Natriumjodatkonzentration in Masseprozent (% m/m) nach folgender Formel:
dabei ist:
m = Masse der Probe (5.1) in g
V = Gesamtvolumen der nach 5.1 erhaltenen Probenlösung in ml
c = aus Eichkurve (5.3) entnommene Natriumjodatkonzentration in mg/ml
7. WIEDERHOLBARKEIT (1)
Bei einem Natriumjodatgehalt von 0,1 % (m/m) darf die Differenz zwischen den Ergebnissen zweier Parallelbestimmungen, die an der gleichen Probe vorgenommen wurden, 0,002 % nicht überschreiten.
8. BESTÄTIGUNG
8.1. Prinzip
In einer angesäuerten Lösung des kosmetischen Produktes wird das Jodat (JO3–) durch Sulfit zu Jodid (J–) reduziert und die erhaltene Lösung mittels HPLC untersucht. Verschwindet nach der Behandlung mit Sulfit ein mit seiner Retentionszeit dem Jodat entsprechender Peak, so kann der ursprüngliche Peak mit größter Wahrscheinlichkeit Jodat zugeschrieben werden.
8.2. Verfahren
Pipettiere 5 ml der nach 5.1 gewonnenen Probelösung in einen Erlenmeyer.
Stelle den pH der Lösung mit Salzsäure (3.1) unter Verwendung von Universalindikatorpapier (3.7) auf einen Wert von 3 oder niedriger ein.
Füge 3 Tropfen Natriumsulfitlösung (3.2) hinzu und mische. Injiziere 10
l dieser Lösung in den Flüssigkeitschromatographen (4.2).
Vergleiche dieses Chromatogramm mit demjenigen, das bei der gleichen Probe nach Abschnitt 5 erhalten wurden.
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(1) Nach der Norm ISO 5725.